旋光計是研究物質旋光性的儀器,通常用于確定穿過旋光物質的平面偏振光的旋光大小和方向,從而定量地確定旋光物質的濃度,確定某些有機分子的三維結構。
(1)將旋光計連接至220V交流電源,打開電源開關,大約5分鐘后,鈉燈將正常發光,然后即可開始測量。調節目鏡的焦點,使視野非常清晰。當旋轉器未配備旋轉物質時,視場中各部分的亮度相同。
在目鏡中觀察到的中間和側面具有不同亮度和暗度的三分區視場可能具有以下條件:中間稍暗,兩側強光;中間較暗,視野兩側較亮;場的兩側都較暗,中間更亮;視野中三個區域的亮度變暗,亮度和暗度趨于相等,三點視野消失。此方法是區分三點視場的明暗度的靈敏方法,因此讀數是將分析儀轉向三點視場并消失時的讀數。整個視場都是明亮的,但是由于視場太亮,不利于確定三點視場是否消失,因此無法通過這種標準來測量旋光度。
(2)零點校準蒸餾水是一種非光學活性物質,可以用于校準儀器的零點(即,α=0時儀器刻度盤上的讀數)。校準時,清潔200mm的樣品管,將其一端密封,用蒸餾水填充,并使管口成凸狀液面,再加一塊玻璃蓋和一個螺帽蓋(應(試管中沒有氣泡),但建議不要擰緊蓋子,以免壓碎玻璃。用濾紙擦拭旋光儀兩端的玻璃板,然后將它們放入旋光儀中。打開光源并調整焦點以使視野清晰。旋轉轉盤先進行粗調,然后再進行細調以使視場變暗。當三點視野消失時,記下轉盤的讀數,重復操作三次,取平均值。這是旋光儀的零點,稍后將對其進行測量。零點校正值應減去或加到該值上。
(3)用與(2)相同的方法測量樣品的旋光度。
(4)注意事項旋光計的金屬部分一定不能被酸或堿污染,以避免腐蝕。每次測量之前,旋光儀周圍和兩端的玻璃板都必須清潔。實驗結束后,應擦凈旋光儀測量罐的內外,并用水沖洗旋光儀管并使其干燥。